医用一次性口罩溶血性链球菌的检测方法
1.1操作步骤
取样液5 ml加入到50 ml,葡萄搪肉汤,35℃士2'c培养24 h.
将培养物划线接种血琼脂平板,35℃士2'c培养24 h观察菌落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色,半透明或不透明,针尖状突起,表面光滑.边缘整齐,周围有无色透明溶血圈。
挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检,应为革兰氏阳性,呈链状排列的球菌。镜检符合上述情况,应进行下列试验:
链激酶试验:吸取草酸钾血浆0.2 ml (0.01 g草酸钾加5 ml兔血浆混匀,经离心沉淀,吸取上清液).加入0. 8 ml灭菌生理盐水,混匀后再加入待检菌24 h肉汤培养物0. 5 ml,和0.25%氯化钙0. 25 ml,混匀,放3510士2℃水浴中,2 min观察一次(一般10 min内可凝固),待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2h内不溶化,继续放置24 h观察,如凝块全部溶化为阳性,24 h仍不溶化为阴性。
杆菌肤敏感试验:将被检菌菌液涂于血平板上,用灭菌镊子取每片含0.04单位杆菌肤的纸片放在平板表面上,同时以已知阳性菌株作对照,在35℃士2℃下放置18-24 h,有抑菌带者为阳性。
1.2结果报告
镜检革兰氏阳性链状排列球m,血平板上呈现溶血圈,链激酶和杆m1肢试骏阳性,可报告被检样品检出溶血性链球菌。